Kako deluje Gibsonovo kloniranje?
Kako deluje Gibsonovo kloniranje?

Video: Kako deluje Gibsonovo kloniranje?

Video: Kako deluje Gibsonovo kloniranje?
Video: Kloniranje (sony vegas) 2024, November
Anonim

The Gibsonovo kloniranje Master Mix je sestavljen iz treh različnih encimov v enem pufru. Vsak encim ima specifično in edinstveno funkcijo za reakcijo: eksonukleaza T5 - ustvari enoverižne DNA 3' previse z žvečenjem nazaj s konca DNK 5'. Komplementarni fragmenti DNK se lahko naknadno spojijo drug z drugim.

Glede na to, kako deluje Gibson?

The Gibson Metoda Assembly® je postopek kloniranja, ki omogoča kloniranje dveh ali več fragmentov brez potrebe po prebavi z restrikcijskim encimom ali združljivih restrikcijskih mestih. Namesto tega so v fragmente vključeni uporabniško določeni prekrivajoči se konci, ki omogočajo brezhibno spajanje sosednjih fragmentov.

Podobno, kaj je v Gibson Assembly Master Mixu? The Gibsonov mojster kloniranja je sestavljen iz treh različnih encimov v enem pufru. Vsak encim ima specifično in edinstveno funkcijo za reakcijo: eksonukleaza T5 - ustvari enoverižne DNA 3' previse z žvečenjem nazaj s konca DNK 5'. Komplementarni fragmenti DNK se lahko naknadno spojijo drug z drugim.

Kako na ta način deluje montaža Golden Gate?

zlata vrata kloniranje oz Montaža Golden Gate je metoda molekularnega kloniranja, ki omogoča raziskovalcu, da hkrati in usmerjeno sestavi več fragmentov DNK v en kos z uporabo restrikcijskih encimov tipa II in ligaze T4 DNA. tole montaža je izvaja in vitro.

Kako deluje kloniranje prehoda?

The GATEWAY Kloniranje Tehnologija temelji na sistemu za rekombinacijo, specifičnem za mesto, ki ga uporablja fag l za integracijo svoje DNK v E. Mesta attL in attR, ki obkrožajo vstavljeno fagovo DNK, se med ekscizijskim dogodkom rekombinirajo specifično za mesto, da reformirajo mesto attP v fagu l in attB mesto v E.

Priporočena: