Ali lahko sekvencirate PCR izdelek?

2024 Avtor: Stanley Ellington | [email protected]. Nazadnje spremenjeno: 2023-12-16 00:23

Neposredno Zaporedje od PCR izdelki . Neposredno je povsem mogoče zaporedje a PCR izdelek brez predhodnega kloniranja fragmenta. Neposredno PCR sekvenciranje je le redko uspešna, razen če ti porabite nekaj časa, da to zagotovite ti ne spadajo v eno od številnih pasti.

Kaj je na ta način sekvenciranje PCR?

Neposredno Zaporedje od PCR Izdelki. Vse morate odstraniti PCR začetnice in neinkorporirane nukleotide, preden je produkt sekvencirano . Zaporedje uporablja samo en temeljni premaz namesto dveh uporabljenih v PCR . Če ne odstranite obeh temeljnih premazov, boste dobili dva zaporedja drug na drugega, ki ni berljiv.

Podobno ali lahko za sekvenciranje uporabim PCR primerje? PCR primerji so namenjeni za PCR ojačanje, da dobimo amplikon. Primerji za sekvenciranje so uporabljeno do zaporedje fragment DNK in razkrije njeno DNK zaporedje identificirati. 4. Dva PCR primerji so potrebni v a PCR reakcija (običajno); samo en sekvencirni primer je dodan k a zaporedje reakcijo.

Ob upoštevanju tega, kako testirate izdelke PCR?

Odkrivanje in analiza PCR izdelki . The izdelek od a PCR mora biti fragment ali fragmenti DNK določene dolžine. Za odkrivanje ojačanih zaporedij je mogoče uporabiti številne tehnike (glejte tabelo). Najpreprostejša in pogosto uporabljena tehnika je elektroforeza PCR izdelek na agaroznem gelu z EtBr (etidijev bromid).

Zakaj je treba pred sekvenciranjem prečistiti produkte PCR?

Čiščenje DNK iz a PCR reakcija je običajno potrebno za nadaljnjo uporabo in olajša odstranjevanje encimov, nukleotidov, začetnih in puferskih komponent.