Zakaj se restrikcijski encim ne bi zmanjšal?
Zakaj se restrikcijski encim ne bi zmanjšal?

Video: Zakaj se restrikcijski encim ne bi zmanjšal?

Video: Zakaj se restrikcijski encim ne bi zmanjšal?
Video: факторы затрагивающий фермент Мероприятия: энзим кинетика 2024, November
Anonim

Razlogov za to je lahko več različnih restrikcijski encim ne reže DNK, kot je prikazano v tem videoposnetku. Priprava DNK, ki jo je treba cepiti bi moral ne smejo vsebovati kontaminantov, kot so fenol, kloroform, alkohol, EDTA, detergenti ali prekomerne soli, ki lahko vplivajo na restrikcijski encim dejavnost.

V zvezi s tem, zakaj restrikcijski encimi ne razrežejo bakterijske DNK?

Bakterije imeti restrikcijskih encimov , imenovan tudi restrikcijske endonukleaze , ki rezati dvoverižna DNK na določenih mestih na drobce. Zanimivo, restrikcijskih encimov ne cepijo svojih DNK . Bakterije preprečijo svoje DNK od sekati do restrikcijski encim z metilacijo omejitev strani.

Lahko se tudi vprašamo, kje se režejo restrikcijski encimi? Omejevalni encim Vrste Na splošno tip I encimi razrezani DNK na lokacijah, ki so oddaljene od zaporedja prepoznavanja; Tip II rezati DNK znotraj ali blizu zaporedja prepoznavanja; Tip III rezati zaporedja za prepoznavanje blizu DNK; in tip IV cepi metilirano DNK.

Podobno se postavlja vprašanje, kaj se zgodi, če dodate preveč restrikcijskega encima?

Lahko pride do nepopolne prebave ko preveč oz tudi malo encim se uporablja. The prisotnost kontaminantov v the Vzorec DNK lahko zavirati encimi , kar ima za posledico tudi nepopolno prebavo. nekaj restrikcijskih encimov zahtevajo kofaktorje za polno aktivnost.

Zakaj moj omejevalni povzetek ne deluje?

Nepopolna ali ne prebavo zaradi encimske aktivnosti, blokirane z metilacijo DNA. Če je vaš encim aktiven in prebavi nadzor DNK in the reakcija je nastavljena z optimalnimi pogoji, vendar še vedno vidite vprašanja z prebavo , morda zato, ker the encim se inhibira z metiliranjem the predlogna DNK.

Priporočena: