Kazalo:

Kako vstavite gen v plazmid?
Kako vstavite gen v plazmid?

Video: Kako vstavite gen v plazmid?

Video: Kako vstavite gen v plazmid?
Video: Плазмиды: общая информация и классификация 2024, November
Anonim

Osnovni koraki so:

  1. Odprite plazmid in "prilepite" v gen . Ta proces temelji na restrikcijskih encimih (ki razrežejo DNK) in DNK ligazi (ki se združi DNK).
  2. Vstavi the plazmid v bakterije.
  3. Odrasti veliko plazmid -nosijo bakterije in jih uporabljajo kot "tovarne" za izdelavo beljakovin.

Tudi, kako je mogoče gen vstaviti v plazmid GCSE?

je vstavljen v plazmid z uporabo encimov ligaze. the plazmid gre v bakterijska celica. transgenska bakterija se razmnožuje, kar ima za posledico v na milijone enakih bakterij, ki proizvajajo humani inzulin.

Poleg tega, kako subklonirate gen? Osnovni koraki za Subkloniranje Svoj vložek sprostite in očistite iz matičnega vektorja, ta vložek povežete v pripravljen ciljni vektor, to ligacijsko reakcijo pretvorite v kompetentne bakterijske celice. Nato transformirane celice pregledate za vložek.

Ob upoštevanju tega, kateri so 4 koraki kloniranja genov?

V klasičnih protokolih kloniranja z restrikcijskim encimom in ligacijskim kloniranjem kloniranje katerega koli fragmenta DNK v bistvu vključuje štiri korake:

  • izolacija DNK, ki nas zanima (ali ciljne DNK),
  • ligacija,
  • transfekcija (ali transformacija) in.
  • postopek presejanja/izbire.

Kako pomnožite plazmid?

Eksperimentalni postopek

  1. Zaženite PCR in očistite izdelek PCR: Zaženite PCR, da pomnožite svojo vstavljeno DNK.
  2. Prebavite svojo DNK:
  3. Izolirajte svoj vložek in vektor s čiščenjem gela:
  4. Povežite svoj vložek v svoj vektor:
  5. transformacija:
  6. Izolirajte končni plazmid:
  7. Preverite svoj plazmid z zaporedjem:

Priporočena: