Kakšen je namen uporabe ddNTP?

2024 Avtor: Stanley Ellington | [email protected]. Nazadnje spremenjeno: 2023-12-16 00:23

DdNTP se nanaša na Dideoksinukleotidi trifosfati, ki se uporabljajo v Sangerjevi dideoksi metodi za proizvodnjo različnih dolžin verig DNK za sekvenciranje DNK. To ima za posledico prekinitev procesa polimerizacije DNA (ali raztezka DNK), ker ta proces potrebuje 3'-OH skupino za nadaljevanje.

Zakaj se ddNTP uporabljajo pri zaporedju?

Dideoksinukleotidi so zaviralci DNA polimeraze, ki podaljšujejo verigo, rabljeno v Sangerjevi metodi za DNK zaporedje . Dideoksiribonukleotidi nimajo 3' hidroksilne skupine, zato ne more priti do nadaljnjega raztezanja verige, ko je ta dideoksinukleotid na verigi. To lahko privede do prekinitve DNK zaporedje.

Podobno se ddNTP-ji pritrdijo na dNTP-je? Eden ali več od dNTP so radioaktivno označeni za pomoč pri vizualizaciji produktov replikacije. Končno vsaka cevka dobi enega od štirih posebnih nukleotidov, imenovanih dideoksinukleotidi ( ddNTP ). Vendar, ko je enkrat vgrajena, DNK polimeraza ne more nadalje razširiti verige, ker potrebuje 3'-OH za pritrdite do naslednjega nukleotida.

Podobno se lahko vprašamo, kako ddNTP ustavijo reakcijo sekvenciranja?

Ko je prisoten v majhnih količinah v sekvenciranje reakcij , dideoksiribonukleozid trifosfati ( ddNTP ) končati zaporedna reakcija na različnih mestih v rastočih verigah DNK. ddNTP ustavijo reakcijo sekvenciranja ker: povzročijo, da DNK polimeraza odpade s verige predloge. c.

Katero tehniko, ki vključuje dideoksinukleotide, bi lahko uporabili?

Sangerjevo zaporedje je a metoda zaporedja DNK, ki temelji na selektivni vključitvi zaključka verige dideoksinukleotidi z DNA polimerazo med in vitro replikacijo DNA. Leta 1977 so ga razvili Frederick Sanger in njegovi sodelavci in je bil najbolj razširjen rabljeno zaporedje metoda za približno 40 let.