Zakaj se glukoza uporablja pri izolaciji plazmidne DNA?
Zakaj se glukoza uporablja pri izolaciji plazmidne DNA?

Video: Zakaj se glukoza uporablja pri izolaciji plazmidne DNA?

Video: Zakaj se glukoza uporablja pri izolaciji plazmidne DNA?
Video: Глюкоза — что это такое и зачем нужно человеку! 2024, November
Anonim

Namen tega koraka je povečati začetni volumen celic, tako da je več plazmidna DNA se lahko izolira na pripravo. Glukoza se doda za povečanje osmotskega tlaka zunaj celic. Tris je pufersko sredstvo rabljeno za vzdrževanje konstantnega pH (= 8,0).

Prav tako, kakšna je vloga glukoze pri ekstrakciji DNK?

50 mM (milimolarno) glukozni sladkor se doda v pufer GTE za vzdrževanje osmolarnosti, kjer je koncentracija topljenca zunaj celic blizu koncentraciji znotraj celic. To preprečuje prezgodnjo lizo celic, ki lahko povzroči znižanje DNK popusti zaradi agregacije in razgradnje.

Poleg tega, zakaj se NaOH uporablja pri ekstrakciji DNK? V Izolacija DNK ali ekstrakcija , NaOH ( Natrijev hidroksid ) je rabljeno kot pufer za alkalno lizo. V bistvu pomaga pri raztapljanju celične membrane, tako da notranje komponente celice, vključno z DNK Pridi ven.

Kaj je torej namen izolacije plazmidne DNA?

Izolacija plazmidov . The izolacija od plazmidna DNA iz bakterij je ključna tehnika v molekularni biologiji in je bistven korak v številnih postopkih, kot so kloniranje, DNK sekvenciranje, transfekcija in genska terapija. Te manipulacije zahtevajo izolacija visoke čistosti plazmidna DNA.

Kako izolirate plazmidno DNK iz E coli?

The izolacija od plazmidna DNK iz E . coli uporaba alkalne lize je dobro uveljavljena metoda. E . coli z plazmid se goji v mediju z antibiotiki do visoke gostote celic, pobere in nato lizira z raztopino SDS/NaOH.

Priporočena: